260比230值多少合適

⑴ RNA質量中260:230是什麼意思

A260:A230是分光光度計測量RNA溶液的濃度出現的數值，表示樣品的純度。

1、A260nm：核酸的吸收峰測，測RNA，DNA等的濃度用的。260nm是核酸分子吸收峰的波長，是核酸最高吸收峰的吸收波長，最佳測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍，稀釋或濃縮樣品，使之在此范圍內；如果吸光度小於0.05，檢查是否存在操作因素（如移液不準確，樣品內有懸浮物等）影響。

2、A230nm：測定碳源物質，如酚，糖類等濃度用的，是碳水化合物最高吸收峰的吸收波長，比值可進行核酸樣品純度評估。A230表示樣品在230nm的波長處出現了吸收。在A230處出現吸收峰的原因是樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等。

3、A260:A230可以表徵樣品的純度，A260:A230的比值大於1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低於1.8 或者2.0，表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。

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一、RNA質量檢驗。

RNA樣品的品質檢測一般分為總量，純度與完整性三大項。

1、總量：微量分光光度計測260nm吸收值計算。

2、純度：微量分光光度計測260nm/230nm吸收值的比值，用於評估有機溶劑殘留；260nm/280nm吸收值的比值，用於評估蛋白質污染比例。

3、完整性：以Agilent Bioanalyzer進行毛細管電泳(capillary electrophoresis)，並以軟體的RIN(RNA Integrity Number)分數評估，10為RNA完整性最好，0為最差。

二、RNA純度。

RNA在純化過程中容易受到DNA、蛋白質及有機溶劑的影響，這些殘存物將會影響以後的操作。

光譜分析(NANODROP)利用物質對不同波長光的吸收度的不同，可以鑒別出溶液純度及濃度。

RNA溶液的A260/A280的比值是一種RNA純度檢測方法，比值范圍一般為1.8-2.1。各項實驗對RNA純度要求不一，比如即使比值超出這個范圍，RNA樣品也一樣可以用於一些普通實驗中，如Northern雜交、RT-PCR、熒光定量PCR和RNA酶保護等實驗。

⑵ rna提取260/230比值多少合適

260/230比值偏小，是有鹽污染，解決的辦法是：
在乙醇洗脫步驟時：
1、75％乙醇，4℃，7500g/min，離心5min；
2、倒掉乙醇，再加入75％乙醇，條件同上，做第二次洗脫（注意，這次EP管在離心機
里的擺放方向與第一次相反，以便能更全面的洗脫）；
3、再次掉轉EP管在離心機中的方向（不再加入乙醇），7500g/min，4℃，離心3min
後，用200μl的槍小心吸去乙醇（注意不要吸到管底的RNA），然後開蓋晾乾乙醇即
可。
這樣做後，比只用乙醇洗一次的效果要好很多，我們所提RNA用nanodrop測得260/230
值均在2.0左右。
注意倒掉乙醇後再離心一次，把沾在管壁的乙醇離下來

⑶ 提取rna濃度在多少才算好的

rtpcr時提取rna的濃度和純度要求：濃度20ng/ul以上足夠了，如果用的是組織提取，濃度一般很高，可以達到幾百甚至幾千。如果你用的是病毒、少量細胞，濃度低一些也沒有關系。純度需要用儀器測一下。260/280理論值應該有2.0以上，260/230值1.2以上基本合格。RT-PCR：最重要的是RNA是否有明顯降解，這個需要跑電泳看。一般來說28S應該比18S亮1.5-2.0倍，說明提取得不錯。反轉錄·聚合酶鏈反應（reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR）是將RNA的反轉錄（reversetranscription）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR技術靈敏而且用途廣泛，可用於檢測細胞中基因表達水平，細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作為模板的RNA可以是總RNA、mRNA或體外轉錄的RNA產物。無論使用何種RNA，關鍵是確保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染。提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，採用Oligo（dT）或隨機引物利用反轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板經行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。

⑷ 提的RNA260/230在1.0左右可以用嗎

提的RNA260/230在1.0左右可以用。

260/230比值偏小，是有鹽污染，260/230偏小說明溶液中含有有機溶劑，會對酶的效率有影響。

75％乙醇，4℃，7500g/min，離心5min；倒掉乙醇，再加入75％乙醇，條件同上，做第二次洗脫；再次掉轉EP管在離心機中的方向（不再加入乙醇），7500g/min，4℃，離心3min後，用200μl的槍小心吸去乙醇，開蓋晾乾乙醇即可。

飽和與不飽和溶液的互相轉化：

不飽和溶液通過增加溶質（對一切溶液適用）或降低溫度（對於大多數溶解度隨溫度升高而升高的溶質適用，反之則須升高溫度，如石灰水）、蒸發溶劑（溶劑是液體時）能轉化為飽和溶液。

飽和溶液通過增加溶劑（對一切溶液適用）或升高溫度（對於大多數溶解度隨溫度升高而升高的溶質適用，反之則降低溫度，如石灰水）能轉化為不飽和溶液。

⑸ a260/230比值低於1.8能用嗎

不可以用的，數值低於1.8有污染，

輸出結果的含義：

1. A260nm——核酸最高吸收峰的吸收波長。

2. A280nm——蛋白最高吸收峰的吸收波長。

3. A230nm——是碳水化合物最高吸收峰的吸收波長。

4. A340nm——是基線校準波長，為檢測溶液樣品的濁度和其他干擾因子。該值應該接近0.0。如果不是，表明溶液中有懸浮物，需要純化樣品。純樣品的A340一般是0。

● A230產生負值主要是由於在很低 DNA 濃度的溶液中的一些其他成分的干擾所導致的。在下一個測定中，需要降低樣品的稀釋度，A230的負值會被校正。

● A260/A280比值可進行核酸樣品純度評估：純DNA的A260/A280比值為1.8，純 RNA的A260/A280比值為2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚類物質的污染，需要純化樣品。

● A260/A230比值可進行核酸樣品純度評估：純

DNA和RNA的A260/A230比值為 1.8 –

2.2。若比值小於1.8表明樣品被碳水化合物（糖類）、鹽類或有機溶劑污染，需要純化樣品。當 260/230<1

時，通常只有兩種情況。一是胍鹽污染，二是蛋白污染。

dna提取時260/230比值較低。

1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸鹼度及離子強度的影響，如酸溶液會使A260/A280比值降低，低離子強度和低 pH 溶液會增加 280 nm 處的光吸收值。因此必須確保空白檢測和溶解樣品所用Buffer的離子濃度和pH值一致。

2. 濃度接近2 ng/μl濃度的樣品可能會導致不可靠的260/280和/或260/230的比值。

3. 樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素，由於樣品中不可避免存在一些細小的顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會干擾測試效果。樣品的濃度不能過低，或者過高（超過光度計的測試范圍）。

⑹ 純的DNA OD260/280在 ，OD260/230應大於 。

260/280應該在1.9左右，反應DNA的質量。260/230也應在1.7左右，反應提取時的有機溶劑是否清洗干凈。

⑺ 植物DNA提取實驗，結果od260、od280、od230都很低，但是od260/280和od260/230值都在正常范圍內，為什麼

一、概念解析

首先我們需要明白的是，OD260和OD280，OD230代表了什麼意思。

1、OD260代表了核酸的吸光度;

2、OD280代表了蛋白質的吸光度;

3、OD230代表了苯酚類等雜質的吸光度;

二、分析如下:

1、由此可見，決定DNA的因素主要是260這個值，而其他的兩個值只是用來判斷樣本中是否有其他雜質，雜質是什麼物質這個問題。

至於後面的OD260/OD280,OD260/OD230這兩個比值，其實就是在滿足以上OD260的情況下才去參考的值，用於區分DNA的純度問題。

2、除去DNA的本質吸光度問題，其他的暫不具有可參考意義，所以及使即使比值是正常的，但不能說明實質性問題。

三、問題查找

1、以上結果首先比對抽提方法，以及使用試劑盒是否符合植物的DNA提取。

2、通過瓊脂糖凝膠電泳或者4200或2100質控DNA的基本屬性，觀察此時值的變化。

3、也可以通過sanger測序簡單驗證，結果更准確。

⑻ 提取的DNA測OD值是260/230小於1.7是什麼原因

比值低於1.8 或者2.0，表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。

A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大於2.0。A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。

A260/A280和A260/A230是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA，在pH7-8.5下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。

純凈的樣品比值大於1.8（DNA）或者2.0（RNA）。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物、鹽（胍鹽）等，較純凈的核酸A260/A230的比值大於2.0 。

當 0.5％BSA蛋白質污染時，蛋白污染會導致260和280的數值都下降，其凈結果是260/280比值下降，但260/280的比值變化並不顯著，正如分子克隆3所說。

但蛋白殘留會導致230的數值顯著上升，顯著影響260/230的比值。也就是說，如果RNA樣品的260/280＝1.7，260 /230＝0.5，那麼就應該考慮污染原因不是胍鹽殘留，而是蛋白殘留。

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測DNA或RNA的OD值的含義：

范圍內表示提取的DNA純度較好,若小於1.7可能有蛋白污染，若大於2.0則說明有RNA污染或者DNA已經降解。260/230測的結果一般作為參考值，RNA提取時如果該值小於2說明裂解液中有異硫氰酸胍和巰基乙醇殘留。

使DNA的純度高，首先樣品量合適，不能反復凍融，研磨時要充分，隨時補充液氮，在樣品未完全解凍前迅速加入裂解液中，後面的操作應盡量柔和，避免造成損傷。

RNA及DNA的提取,260/280測定用來鑒定DNA及RNA的純度。260/280的值在1.8-2.0之間最好。

RNA 260/280<1.8說明有蛋白質、酚的污染，>2.0說明RNA降解。

DNA 260/280<1.8說明有蛋白質污染，>2.0說明RNA污染。

⑼ RNA抽提時 260/230的值不對是什麼原因

260/230的值應該大於2，小於2主要是鹽濃度高了，但一般沒關系。