濃縮DNA一般多少溫度

❶ DNA的溶解溫度一般在什麼范圍內 不好意思，是熔解溫度~

你確定是溶解不是熔解吧?
常用的是室溫或者37℃,保存於4℃或者-20℃.
一般在TE溶液中,把DNA沉澱盡量吹散37℃放置1個小時.後如果發現還不能溶解的話,說明可能有陽離子鹽類或者蛋白之類的跟DNA結合,如果是陽離子的加點Mg2+看看能不能起到一點作用,不過得防止你的DNA被降解了.

❷ 植物基因在組DNA提取為什麼在65度水浴保溫2

植物基因在組DNA提取為什麼在65度水浴保溫
不同生物（植物、動物、微生物）的基因組DNA的提取方法有所不同; 不同種類或同一種類的不同組織因其細胞結構及所含的成分不同，分離方法也有差
異。在提取某種特殊組織的DNA時必須參照文獻和經驗建立相應的提取方法, 以獲得可用的DNA大分子。尤其是組織中的多糖和酶類物質對隨後的酶切、PCR反應等有較強的抑製作用,因此用富含這類物質的材料提取基因組DNA時, 應考慮除去多糖和酚類物質。
本實驗以水稻幼苗為材料,學習基因組DNA提取的一般方法。
DNA
一、材料
水稻幼苗
二、設備
移液器，冷凍高速離心機，台式高速離心機，水浴鍋，陶瓷研缽，50ml離 心管（有蓋）及5ml和1.5ml離心管，彎成鉤狀的小玻棒。
三、試劑
1、提取緩沖液?：100mmol/L Tris?Cl, pH8.0, 20mmol/L EDTA, 500mmol/L
NaCl, 1.5% SDS。
2、提取緩沖液?：18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸鈉，6.0gPVP，240ul巰基乙醇，加水至300ml。
3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇
4、 RnaseA母液：配方見第一章。
5、其它試劑：液氮、異丙醇、TE緩沖液，無水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。
四、操作步驟：
（一）水稻幼苗或其它禾木科植物基因組DNA提取
1. 在50ml離心管中加入20ml提取緩沖液?, 60?水浴預熱。
2. 水稻幼苗或葉子5-10g, 剪碎, 在研缽中加液氮磨成粉狀後立即倒入預熱
的離心管中, 劇烈搖動混勻, 60?水浴保溫30-60分鍾(時間長,DNA產量高), 不時搖動。
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 顛倒混勻(需帶手套, 防止損傷皮膚)，室溫下靜置5-10分鍾, 使水相和有機相分層(必要時可重新混勻)。
4. 室溫下5000rpm離心5分鍾。
5. 仔細移取上清液至另一50ml離心管,加入1倍體積異丙醇,混勻,室溫下放置片刻即出現絮狀DNA沉澱。
6. 在1.5ml eppendorf中加入1ml TE。用鉤狀玻璃棒撈出DNA絮團,在干凈吸水紙上吸干,轉入含TE的離心管中,DNA很快溶解於TE。
7. 如DNA不形成絮狀沉澱,則可用5000rpm離心5分鍾, 再將沉澱移入TE管中。這樣收集的沉澱,往往難溶解於TE,可在60?水浴放置15分鍾以上，以幫助溶解。
8. 將DNA溶液3000rpm離心5分鍾, 上清液倒入干凈的5ml離心管。
9. 加入5μl RNaseA(10μg/μl), 37? 10分鍾, 除去RNA(RNA對DNA的操作、分析一般無影響，可省略該步驟）。
10. 加入1/10體積的3mol/L NaAc及2×體積的冰乙醇,混勻,-20?放置20分鍾左右,DNA形成絮狀沉澱。

❸ dna復性溫度要多少

溫度55℃-60℃。有規定。dna長短與溫度要求無關。
生物體的每個細胞（極個別例外，如人成熟的紅細胞）每時每刻都進行轉錄形成mRNA.

❹ dna提取的DNA的濃縮

一.固體聚乙二醇（PEG）濃縮：用透析袋外敷PEG至合適量。
二.丁醇抽提濃縮：DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇，但DNA不會。因此重復幾次可顯著減少DNA體積。
三.乙醇或異丙醇沉澱：（1）需要陽離子鹽的存在，NaAc最常用,NaCl對含SDS樣品好，NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉澱RNA好，但不能用於反轉錄前。（2）沉澱溫度與時間；0℃一4℃，12000g，10分鍾，小於100bp DNA需超速離心。
四.精胺沉澱法：與DNA結合後使DNA結構凝縮沉澱，需在無鹽或低鹽溶液。

❺ DNA保存溫度 DNA保存於4攝氏度可以放多久降解情況怎麼樣

為什麼要保存在4℃呢?那好像是臨時保存的溫度.
現提取的樣本的話還是－20℃好些,4℃太容易降解,最好當天用掉.
如果是擴增出來的就好多了,一般一周都沒事,而在負20度可以保存一年.有報道說5℃暗中存於CsCl溶液中每年2000kb中只斷裂一個磷酸二酯鍵,如果是真的這方法倒是很好…

❻ 為什麼一般情況下選擇94℃30s可使各種復雜的dna分子完全變性

為什麼一般情況下選擇94℃30s可使各種復雜的dna分子完全變性
基於PCR原理三步驟而設置變性-退火-延伸三個溫度點.在標准反應中採用三溫度點法,雙鏈DNA在90～95℃變性,再迅速冷卻至40 ～60℃,引物退火並結合到靶序列上,然後快速升溫至70～75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物鏈沿模板延伸.對於較短靶基因(長度為100～300bp時)可採用二溫度點法, 除變性溫度外、退火與延伸溫度可合二為一,一般採用94℃變性,65℃左右退火與延伸(此溫度Taq DNA酶仍有較高的催化活性).
1. 變性溫度與時間：變性溫度低,解鏈不完全是導致PCR失敗的最主要原因.DNA在其鏈分解溫度時的變性只需幾秒鍾,但反應管內達到Tss還需一定時間,變性溫度太高會影響酶活性;通常情況下93℃～94℃1min足以使模板DNA變性,若低於93℃則需延長時間,但溫度不能過高,因為高溫環境對酶的活性有影響.變性所需的加熱溫度取決於模板及PCR產物雙鏈DNA中的G+C含量.雙鏈DNA中的G+C的比率越高,則雙鏈DNA分離變性的溫度也就越高.變性所需的時間與DNA分子的長度相關,DNA分子越長,在特定的變性溫度下使雙鏈DNA分子完全分離所需的時間就越長.若變性溫度太低或變性時間太短,則只能使DNA模板中富含AT的區域產生變性,當PCR循環中的反應溫度降低時,部分變性的DNA模板又重新結合成雙鏈DNA,從而導致PCR的失敗.

❼ DNA的變性溫度比蛋白質高,那麼DNA變性失活的溫度是多少

DNA變性的溫度基本都會設置在90C以上，這樣可以滿足雙鏈變性成單鏈。但是一旦溫度降低，溶液中的兩條互補的單鏈又會重新退火到一起，形成雙鏈，任然具有生物學活性，並沒有喪失活性。有人為了獲得單鏈形式存在的DNA，會先進行5-10min的煮沸，然後急冷，讓變成單鏈的DNA不再退火成雙連。
不像蛋白，經過高溫加熱後，蛋白質變性，絕大部分就很難恢復了。
當然，如果將DNA在高溫條件下長時間保存的話，會造成DNA的降解。所以不知道你是想讓DNA變性，還是想讓DNA失活？為什麼？如果是為了要降解樣品中的DNA的話，建議使用DNase。

❽ 請問dna在多少度高溫下會破壞到無法檢測

DNA在90～95度雙鏈中的氫鍵會斷裂，雙鏈會解旋，即使回到原來的溫度，沒有dna聚合酶的幫助很難重新組合。但是DNA是雙鏈反向對稱的，也就是說只要檢測一條鏈，整條DNA都能檢測出來。也就是說利用高溫使DNA失活可以，但不妨礙檢測。
最後弱弱地問一句，題主想幹啥壞事捏？

❾ 我想問我回收下來的DNA應該放到多少度保存在線等待

先問一下你下一步需要做什麼？保存多長時間？

如果明天用，你可以放在-20凍上。既方便下一步實驗，又可以有效保存。不建議長期保存這個東西，比如一個月。不過如果下一步連接，你的量比較大的化，保存一個月之後成功率也挺高的。

一般著一個小步驟，又不是什麼重要的東西，你可以不必保存在-80或者液氮。你把上一步驟的質粒或者PCR模版留好就行了。