氯黴素生產反應溫度多少合適
『壹』 怎樣檢測氯黴素
(組織)氯黴素(CAP)j膠體金快速檢測卡用於快速檢測水產品(魚蝦蟹等)、畜禽肉及水體沉積物中的氯黴素殘留,整個檢測過程只需要30分鍾左右,本試紙條為定性檢測,檢測卡靈敏度為0.2ppb。
(水體)氯黴素(CAP)j膠體金快速檢測卡用於快速檢測水體中的氯黴素殘留,整個檢測過程只需要10分鍾左右,本試紙條為定性檢測,靈敏度為0.3ppb。
檢測原理:
氯黴素檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理,樣品中的氯黴素在流動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合,抑制了抗體和NC膜檢測線(T)上氯黴素-蛋白偶聯物的結合。如果樣品中氯黴素含量大於0.2ppb,檢測線(T)線顯色比C線淺,結果為陽性;反之,檢測線(T)顯色比質控線(C)深或者一樣深,結果為陰性。
結果判定:
1、 陰性(-):檢測線(T)顯色比質控線(C)深或者一樣深,表示樣品中氯黴素濃度低於檢測限或者不含氯黴素。
2、 陽性(+):檢測線(T)線顯色比C線淺,或者檢測線(T)不顯色,表示樣品中氯黴素殘留濃度大於檢測限。
3、 無效:質控線(C)不顯色;可能是操作不當或者檢測卡失效。用新的檢測卡重新檢測。
『貳』 氯黴素耐受溫度能在高溫下滅菌么
不耐受。不能。
氯黴素屬於抗生素,所有抗生素都要在培養基高溫高壓滅菌後通過無菌操作加入。
『叄』 300°以上的高溫能否令氯黴素失效
會,高溫環境會破壞所有抗生素的結構,從而使之失去葯效。
『肆』 抗生素在100度左右溫度下失效嗎
不同類型的抗生素的熱穩定性不同的。
氯黴素類抗生素,如氯黴素,熱穩定性很好,即使煮沸5小時都對抗菌效果無影響。
內醯胺類(大部分青黴素類衍生物抗生素)以及大環內酯類抗生素(紅黴素等)在高溫下容易開環,而氨基糖苷類等抗生素熱穩定性就好一些。
比如在我們生物學研究中,氨苄黴素(內醯胺類)的熱穩定性就弱於卡那黴素(氨基糖苷類)。氨基糖苷類抗生素,常見的有慶大黴素、卡那黴素、鏈黴素、新黴素。
抗生素的種類、特性、作用和適用范圍
大環內酯類
常用的有紅黴素、克拉黴素、羅紅黴素、阿奇黴素、交沙黴素、麥迪黴素、螺旋黴素等
適用於:
呼吸道、皮膚軟組織感染,特別適用於支原體、衣原體和軍團菌所引起的感染,對青黴素過敏者可選用此類抗生素。紅黴素是老牌抗生素,價格便宜,對於軍團菌和支原體感染的肺炎具有相當好的療效,而價格非常高的碳青黴烯類的抗生素和三代頭孢菌素對付這些病不如紅黴素。克拉黴素還可用於治療幽門螺旋桿菌感染。
提醒:
此類抗生素主要不良反應有胃腸道反應(如惡心、腹痛、腹瀉等)及肝功能異常。
青黴素類
常用的有青黴素G、青黴素V、甲氧西林(新青I)、氨苄西林(氨苄青黴素)、阿莫西林(羥氨苄青黴素)、替卡西林(羧噻吩青黴素)、哌拉西林(氧哌嗪青黴素)等
適用於:
呼吸道、皮膚軟組織、泌尿生殖道感染等。主要優點為殺菌作用強,毒副作用少,孕婦及兒童使用較為安全。
提醒:
主要不良反應為過敏反應,包括過敏性休克、過敏性皮炎、血清病、皮疹、接觸性皮炎等。
頭孢菌素類
第一代:有頭孢氨苄(先鋒4號)、頭孢唑林(先鋒5號)、頭孢拉定(先鋒6號)以及頭孢羥氨苄等
適用於:
呼吸道、皮膚軟組織、泌尿生殖道感染等
第二代:常見的有頭孢呋辛、頭孢孟多、頭孢替安、頭孢呋辛酯、頭孢克洛等
比第一代抗菌譜廣、抗G-菌作用比第一代強,但抗G+菌的作用不如第一代,腎臟毒性低;
第三代:常用的有頭孢噻肟、頭孢他定、頭孢曲松、頭孢哌酮、頭孢唑肟、頭孢克肟等
適用於:
呼吸道、皮膚軟組織、泌尿生殖系統、胃腸道感染和敗血症等;具有抗菌譜廣、抗G-菌活性比第二代強、抗G+菌的作用不如第二代,體內分布廣、對人體毒性低等特點。
第四代:目前已上市的有頭孢吡肟、頭孢匹羅等,抗菌譜優於前三代。
氨基糖苷類
是廣譜抗生素,慶大黴素、阿米卡星(丁胺卡那黴素)、妥布黴素、依替米星、奈替米星為常用品種
適用於:
對革蘭陰性桿菌有良好的殺菌作用,適用於下呼吸道、泌尿道、腸道感染等。不同的品種特點不同。其中,依替米星、奈替米星抗菌活性較強、耳腎毒性較低;鏈黴素現主要用於治療結核;大觀黴素(壯觀黴素)可用於治療淋病;新黴素因耳毒性大,僅用於口服和局部外用。
喹諾酮類
抗菌譜廣、抗菌作用強的抗菌葯物,主要有諾氟沙星(氟哌酸)、依諾沙星、環丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、培氟沙星、司帕沙星、莫西沙星等
適用於:
諾氟沙星主要用於腸道感染與尿路感染;依諾沙星和培氟沙星可治療全身感染包括呼吸道感染、皮膚軟組織感染、尿路感染、胃腸道和膽道感染、婦科感染等;環丙沙星是目前應用最廣的品種,適用於治療全身各處的感染,安全有效;氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星對呼吸道感染效果最好
提醒:
主要不良反應有頭痛、頭暈、嘔吐、腹瀉、皮疹、精神異常等。
碳青黴烯類
亞胺培南、美羅培南等是迄今開發的抗菌葯物中抗菌譜最廣、抗菌作用最強的一類
適用於:
全身各處感染
提醒:
劑量偏高時可引起驚厥、抽搐、頭痛等中樞神經系統的不良反應。
『伍』 氯黴素試劑盒被污染了怎麼處理
解決方法
室溫太高(大於25 ℃ ) 保持實驗室溫度20-25℃,避免在熱源或陽光直射處實驗
底物溶液受到污染 若發現底物溶液已經變色,不要再使用
反應時間太長 請嚴格控制實驗反應時間
酶結合物污染了試劑盒中其他試劑 使用過的吸頭立即丟棄,每次吸取不同的試劑要更換新的吸頭,凡是試劑(特別是酶結合物和底物)接觸過的容器立即清洗干凈
使用了質量差的水 嘗試用蒸餾水配製溶液
•問題四、一個或多個標准品數據點超出曲線范圍
可能原因 解決方法
洗滌過程不正確 洗滌時確保每個微孔加樣量一致;每次洗滌時間不要太長(導致過度洗板),也不要太短(洗板不徹底),一般10s左右;洗滌步驟完成後立即進行下一步驟
微孔中的試劑未充分混勻 試劑加完後,在振盪器上振盪混勻(沒有振盪器可輕敲板四周或在桌面上做圓周運動使其充分混勻)
陰性標准品受到污染 嚴格按照試劑盒的操作說明進行實驗
加入標准品和試劑的時間不一致 確保一切就緒,由低濃度到高濃度快速添加標准品並保證不被打擾 美國進口普衛欣天 貓有效防霧霾出門做好防護
標准品添加順序混亂或放置錯誤位置 按照說明要求重復試驗並保證由低到高的順序依次添加
標准品被污染或與其他標准品混淆 改用新標准品
標准品加樣量不準 確保加樣的准確性
『陸』 氯黴素的注意事項
1.由於可能發生不可逆性骨髓抑制,本品應避免重復療程使用。
2.肝、腎功能損害患者宜避免使用本品,如必須使用時須減量應用,有條件時進行血葯濃度監測,使其峰濃度在25mg/L以下,谷濃度在5mg/L以下。如血葯濃度超過此范圍,可增加引起骨髓抑制的危險。
3.在治療過程中應定期檢查周圍血象,長程治療者尚須查網織細胞計數,必要時作骨髓檢查,以便及時發現與劑量有關的可逆性骨髓抑制,但全血象檢查不能預測通常在治療完成後發生的再生障礙性貧血。
4.對診斷的干擾:採用硫酸銅法測定尿糖時,應用氯黴素患者可產生假陽性反應。
孕婦及哺乳期婦女用葯
由於氯黴素可透過胎盤屏障,對早產兒和足月產新生兒均可能引起毒性反應,發生「灰嬰綜合征」,因此在妊娠期,尤其是妊娠末期或分娩期不宜應用本品。
本品自乳汁分泌,有引致哺乳嬰兒發生不良反應的可能,包括嚴重的骨髓抑制反應,因此本品不宜用於哺乳期婦女,必須應用時應暫停哺乳。
兒童用葯
新生兒由於肝臟酶系統未發育成熟,腎臟排泄功能又差,葯物自腎排泄較成人緩慢,故氯黴素應用於新生兒易導致血葯濃度過高而發生毒性反應(灰嬰綜合征),故新生兒不宜應用本品,有指征必須應用本品時,如有條件應在監測血葯濃度條件下使用。
老年患者用葯
老年患者組織器官大多退化,功能減退,自身免疫功能亦降低,氯黴素可致嚴重不良反應,故老年患者應慎用。
『柒』 在微生物培養時氯黴素什麼時候加
液體培養基滅菌後將其溫度冷去至室溫加入氯黴素;固體培養基在滅菌後,當溫度降至能用手支持大約5-6秒即可加入氯黴素。
『捌』 氯黴素能加熱容化嗎,會失效嗎
不能加熱,會發生化學反應的。
『玖』 檢測氯黴素的行業標准
氯黴素檢驗方法 --這是我們公司現在使用的方法,發上來大家指導指導
1. 試劑與材料
1.1氯黴素試劑盒,德國r-Biopharm公司
1.2乙酸乙酯,分析純
1.3雙蒸水
2.儀器與設備
2.1微孔板酶標儀,MuLtisKan Ascent,芬蘭Labsystens公司。
2.2 8道移液器,50-300uL
2.3 單道移液器,5-50ul,20-200ml,100-1000ul,1-5ml
2.4 離心機。
2.5 旋轉蒸發器,配真空冷卻系統。
2.6 液體混勻器。
3.樣品前處理
3.1樣品提取 稱取約2g(准確至0.01g)蜂蜜於20ml具塞試管中,加入用4ml雙蒸水溶解,再加4ml乙酸乙酯,在混勻器上混勻10分鍾。將上述樣液轉至10ml離心管中,以4000轉/分離心12分鍾
3.2凈化 從上述離心管中移取1ml上層的乙酸乙酯(相當於0.5樣品)至另一試管中,60℃以下減壓旋轉蒸干,殘留物用0.5ml緩沖液1溶液,此為樣品溶液,供酶標儀測定
4.測定
4.1 酶標儀測定條件
酶標儀測定波長為450nm
4.2 酶標測定(以下操作在20-24℃室溫條件下進行)
4.2.1測定之前的准備工作
將氯黴素酶試劑盒附帶的所有試劑回升至室溫20-24℃。其中氯黴素酶標記物、氯黴素抗體用緩沖液1以1;11的比例稀釋,在吸取濃縮液之前,要仔細振搖使之充分混勻
4.2.2 標准應用的制備;50uL標准濃縮液(氯黴素試劑盒附帶)用450uL緩沖液1稀釋並混合均勻用玻璃不能用塑料瓶
標准應用液1:50uL標准濃縮液1用450uL緩沖液1稀釋oppt
標准應用液2:50uL標准濃縮液2用450uL緩沖液1稀釋50ppt
標准應用液3:50uL標准濃縮液3用450uL緩沖液1稀釋150ppt
標准應用液4:50uL標准濃縮液4用450uL緩沖液1稀釋450 ppt
標准應用液5:50uL標准濃縮液5用450uL緩沖液1稀釋1350ppt
標准應用液6:50uL標准濃縮液6用450uL緩沖液1稀釋4050ppt
4.2.3.測定程序:
取出實驗需要數量的微孔板條,按順序加入50ul標准或處理好的樣品到各自的微孔中,加入50ul稀%@FI
釋了的酶標記物到微孔底部,加入50ul稀釋了的抗體溶液到每一個微孔中充分混合(輕輕振盪板並在桌面上做圓周運動以混均)用薄膜覆蓋板上在室溫孵育2小時(注意在加入抗體的過程中移液器管尖千萬不要接觸到放進孔中的液體,避免交叉污染)
倒出孔中的液體,將微孔架倒置在吸水紙上拍打(拍打4次)以保證完全除去孔中的液體,用250ul蒸餾水充入孔中(輕輕振盪板並在桌面上做圓周運動),再次倒掉微孔中液體,重復操作兩遍。注意在洗板過程中加洗滌水的移液器管尖必須置於微孔板上方約1厘米處打出洗滌水。洗板後立即進行下一步
操作不要讓板孔乾燥。
迅速加入50ul基質及50ul發色劑到每一個孔中,輕輕振盪板並在桌面做圓
周運動以混均。室溫孵育微孔板30分鍾,注意暗處避光放置。在恆溫孵育期間准備好反應停止液
加入100ul反應停止液,混勻。立即測量,如果不能立即測量請放置在暗處並於60分鍾內450nm測量OD值
5.試劑空白
以2 ml雙蒸水代替樣品,按上述步驟提取
6結果與計算
6.1繪制標准曲線法
所獲得的標准和樣品吸光度值的平均值除以第一個標准(0標准)的吸光度值再乘以100,因此0標准等於100%,吸光度值的百分比表示。
標准(或樣品)的吸光度值360
×100 = %吸光度
0標準的吸光度值
計算標準的值並繪成一個以氯黴素濃度(ng/kg)為半對數坐標系統的曲線圖,曲線在50-1350ng/kg(ppt)范圍內應當成為線性。相對應每一個樣品的濃度(ng/kg)可以從校正曲線上讀出。為了獲得樣品中氯黴素的實際濃度(ng/kg),從校正曲線上讀出的濃度值必須乘以相對應的稀釋系數。(可採用Labsystens公司提供的MuLtisKan Ascent軟體,從計算機上編制測定程序並進行數據處理,可直接讀取樣品氯黴素的濃度值)。7.方法的檢出限、回收率
7.1本方法氯黴素的檢出限為125ng/kg(ppt)
7.2 回收率: 90%
對蜂蜜樣品進行的回收率實驗,結果如下表示.
樣品本底值(ng/kg)添加值(ng/kg)測定值回收率
蜂蜜