植物内真菌如何测定菌量的多少

A. 动物对植物的生长，繁殖有什么影响 细菌和真菌的分布范围是怎样的 怎样检测环境中的细菌和真菌

答：1，传粉使植物顺利地繁殖后代。
传播种子有利于扩大植物分布范围。
过多会对植物的生长产生破坏
2，细菌与真菌生长环境的最大区别就是，细菌需氧，真菌厌氧或兼性厌氧。
3，1、实验中要选取五套培养皿进行实验，一个做为对比，另外四个用来培养不同环境中的细菌，并且是在不同的环境中培养，以便得出细菌和真菌的生存条件。 2、实验所使用的培养皿要经过高温灭菌（让学生想一想是为什么），并且每一组的培养皿要在相同的环境条件下培养。也即是说要准备至少5套培养皿（每一个小组）。因为对比不同环境中的细菌与真菌的存在情况，是属于单因素比较，所以除了采样地点是变量外，进行微生物培养的条件等也要保持一致（温度、湿度等）。 3、经过高温处理后可以将培养皿上、培养基内混有的细菌或真菌的孢子等杀死（经过严格的高温灭菌的环境中是不可能有细菌和真菌存在的），这样就排除了实验外其他环境的污染。因此，在实验前不要盲目的打开培养皿，以防止细菌或真菌的孢子等落在培养基上，实验中用无菌棉棒的目的同样是为了防止棉棒上的微生物污染培养基。也就是说在接种的时候要注意污染。 4、在不同的环境中细菌的分布是不相同的，因此在采集菌种的时候要注意选择环境，做到要有一定的代表性。 5、接种好的培养基要放在特定的环境条件下进行培养。 （将对照组放在一定的环境中培养，将另外四组放在四个不同的环境中进行培养，以便研究细菌和真菌的生存条件，同时也可以思考我们在生活中用什么方法来防止细菌和真菌的污染；尤其是医院又以什么为标准来判断。）

B. 测定微生物数量的方法

现在用的多的就是这几种，楼主挑着看吧

细菌计数1.计数器测定法：
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。本法简便易行，可立即得出结果。
本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法:
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
5、测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6、测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分，含量较稳定，测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法（colour change unit,简称CCU）
这种方法通常用于很小，用一般的比浊法无法计数的微生物，比如支原体等，因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现为清亮透明红色，因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体培养很困难，用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法，即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标，来计数微生物的相对含量的，下面以解脲脲原体为例单介绍其操作：，简
（1）取12只无菌试管，每一管装1.8ml解脲脲原体培养基。
（2）在第一管加入0.2ml待测解脲脲原体菌液，充分混匀，从中吸取0.2ml加入第二管，依次类推，10倍梯度稀释，一直到最末一管
（3）于37度培养，以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的CCU，也就是支原体的最大代谢活力，比如第六管出现颜色改变，他的相对浓度就是10的6次方CCU/ml.
一般来说，比浊法和菌落计数法就可以满足绝大多数细菌的计数，但是对支原体这样比较特殊的微生物，用CCU法比较合适。

C. 短时间内测定细菌或真菌数量的方法。

测OD600检测的是总菌数，死亡细菌也记在内。如果作活菌计数，3-4小时内培养法肯定不行，比较简便的方法就是染色法，有选择啶橙染色法与CTC或INT还原法等，染色后，死菌细胞膜的选择透过性改变，染料进入细胞内，在显微镜下有颜色，无色的就是活菌。可采用类似血细胞计数的方法，在血细胞计数板内计数并计算活菌数。

D. 测定土壤中真菌细菌放线菌数量，怎么测定

实验假设：土壤微生物对淀粉有分解作用(或土壤微生物对淀粉无分解作用)
(2)放入等量淀粉糊，在A烧杯中加入适量土壤浸出液，在B烧杯中加入适量蒸馏水
(4)碘液 斐林试剂
(5)①．与B 1 、B 2 相比，A 1 无蓝色出现，A 2 出现砖红色沉淀(或A 1 、A 2 的颜色分别与B 1 、B2 相同，A 1 出现蓝色，A 2 无砖红色沉淀)
②．A 1 、A 2 的颜色分别与B 1 、B 2 相同，A 1 出现蓝色，A 2 无砖红色沉淀(或与B 1 、B 2 相比，A 1 无蓝色出现，A 2 出现砖红色沉淀)(说明：其他正确答案也可，但实验现象分析必须与实验步骤相一致)

E. 调查池塘中真菌或细菌的数量的方法

A、标志重捕法调查池塘中鲤鱼的种群密度时，设标记总数为a，第二次捕到的总数为b，其中标记数为c，则总鲤鱼数为a×b÷c，标志物脱落使标记鲤鱼（c）数目减少，总鲤鱼数所以会偏大，A错误；
B、探究培养液中酵母菌种群数量时，由于从试管中吸出培养液计数前未震荡使酵母菌沉淀，所以底部吸出的酵母较多，B错误；
C、采用样方法调查草地中的蒲公英时，对于边界线上的个体，要计相邻两条边及夹角中的数目，若样方线上的个体都被统计在内，会导致所得到数值与实际数值偏大，C错误；
D、土壤小动物具有趋湿、趋黑、避高温的特性，如果用诱虫器采集小动物时没有打开电灯，会使数值偏小，D正确．
故选：D．

F. 如何做微生物的大肠菌群测定与细菌总数测定，具体过程最好详细一点。

用稀释涂布平板法
1．样品稀释液的制备 准确称取待测样品l0g，放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置摇床上振荡20min，使微生物细胞分散，静置20-30s，即成10-1稀释液；再用1ml无菌吸管，吸取10-1稀释液lml，移入装有9ml无菌水的试管中，吹吸3次，让菌液混合均匀，即成10-2稀释液；再换一支无菌吸管吸取10-2稀释液1ml，移入装有9ml无菌水的试管中，也吹吸三次，即成l0-3稀释液；以此类推，连续稀释，制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液。

用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时，稀释度应高，反之则低。通常测定细菌菌剂含菌数时，采用10-7、10-8、10-9稀释度，测定土壤细菌数量时，采用10-4、10-5、10-6稀释度，测定放线菌数量时，采用l0-3、10-4、10-5稀释度，测定真菌数量时，采用10-2、10-3、10-4稀释度。

2．平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。

（1）混合平板培养法 将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码，每一号码设置三个重复，用无菌吸管按无菌操作要求吸取10-9稀释液各1ml放入编号10-9的3个平板中，同法吸取10-8稀释液各lml放入编号10-8的3个平板中，再吸取10-7稀释液各lml放入编号10-7的3个平板中（由低浓度向高浓度时，吸管可不必更换）。然后在9个平板中分别倒入已融化并冷却至45—50℃的细菌培养液，轻轻转动平板，使菌液与培养液混合均匀，冷凝后倒置，适温培养。至长出菌落后即可计数。

（2）涂抹平板计数法 涂抹平板计数法与混合法基本相同，所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，待凝固后编号，然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上（每个编号设三个重复）。再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀，每个稀释度用一个灭菌刮铲，更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。在由低浓度向高浓度涂抹时，也可以不更换刮铲。将涂抹好的平板平放于桌上20—30min，使菌液渗透入培养基内，然后将平板倒转，保温培养，至长出菌落后即可计数。

G. 请问真菌的生物量怎么确定呢麻烦详细叙述。

紫外分光光度计测量应该是可行的，但是不知道你测的是什么，若是细胞量应该是控制生长周期、培养条件，应该在测试材料上做文章，尽量保证材料的单一属性。
个人看法，没做过，供参考。

H. 测定水中微生物（包括细菌真菌等）数量的方法

器材及培养

材料和试剂
蒸馏水,自来水,取自儿童公园的湖水,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基.
仪器或其他用具
灭菌三角烧瓶,灭菌带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌量筒.
研究方法
采用平板菌落记数技术测定水中细菌总数.

水样的采取
自来水
先将自来水水龙头用火焰灼烧3min灭菌,再开放水龙头5min后,以灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析.
公园的湖水
应取距水面10~15cm的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻过来,除去玻璃
塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放入冰箱中保存.
细菌总数的测定

• 自来水
  Step1用灭菌吸管吸取1mL水样,注入灭菌培养皿中.共做两个平皿.
  Step2分别倾注约15mL已溶化并冷却到45e左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基.并立即在桌上做平面
  旋摇,使水样与培养基充分混匀.
  Step3另取一个空的灭菌培养皿,倾注肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL,作对照.
  Step4培养基凝固后,倒置与37e温箱中,培养24h,进行菌落记数.

• 公园的湖水
  Step1稀释水样,取三个灭菌空试管,分别加入9mL灭菌水.取1mL水样注入第一管9mL灭菌水
  内,摇匀,再自第一管取1mL到下一管灭菌水内,如此稀释到第三管,稀释度分别为10-1,10-2,10-3.
  Step2自最后三个稀释度的试管中各取1mL稀释水加入空的灭菌培养皿,每一稀释度共做两个培养皿.
  Step3各倾注15mL已溶化并冷却到45e左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基并立即在桌上摇匀.
  Step4凝固后倒置于37e恒温恒湿培养箱中培养24h.

菌落记数方法
1)计算相同稀释度的平均菌落数.若有大片菌苔生长时,弃用;以无片菌苔生长的培养皿记数.若片状菌
苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数@2.
2)选择平均菌落数在30~300之间的平板.只有一个符合此范围时,以该平均菌落数@稀释倍数.有两
个在30~300之间时,按两者菌落总数比值决定,比值小于2,取平均;比值大于2,取较小的菌落数.
3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数@稀释倍数.
4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则按稀释度的平均数@倍数.
5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最近30或300的平均菌落数@稀释倍数.

微生物的含量能否反应水的营养化程度？

能

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