260比230值多少合适

⑴ RNA质量中260:230是什么意思

A260:A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值，表示样品的纯度。

1、A260nm：核酸的吸收峰测，测RNA，DNA等的浓度用的。260nm是核酸分子吸收峰的波长，是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。

2、A230nm：测定碳源物质，如酚，糖类等浓度用的，是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估。A230表示样品在230nm的波长处出现了吸收。在A230处出现吸收峰的原因是样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等。

3、A260:A230可以表征样品的纯度，A260:A230的比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

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一、RNA质量检验。

RNA样品的品质检测一般分为总量，纯度与完整性三大项。

1、总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。

2、纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染比例。

3、完整性：以Agilent Bioanalyzer进行毛细管电泳(capillary electrophoresis)，并以软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。

二、RNA纯度。

RNA在纯化过程中容易受到DNA、蛋白质及有机溶剂的影响，这些残存物将会影响以后的操作。

光谱分析(NANODROP)利用物质对不同波长光的吸收度的不同，可以鉴别出溶液纯度及浓度。

RNA溶液的A260/A280的比值是一种RNA纯度检测方法，比值范围一般为1.8-2.1。各项实验对RNA纯度要求不一，比如即使比值超出这个范围，RNA样品也一样可以用于一些普通实验中，如Northern杂交、RT-PCR、荧光定量PCR和RNA酶保护等实验。

⑵ rna提取260/230比值多少合适

260/230比值偏小，是有盐污染，解决的办法是：
在乙醇洗脱步骤时：
1、75％乙醇，4℃，7500g/min，离心5min；
2、倒掉乙醇，再加入75％乙醇，条件同上，做第二次洗脱（注意，这次EP管在离心机
里的摆放方向与第一次相反，以便能更全面的洗脱）；
3、再次掉转EP管在离心机中的方向（不再加入乙醇），7500g/min，4℃，离心3min
后，用200μl的枪小心吸去乙醇（注意不要吸到管底的RNA），然后开盖晾干乙醇即
可。
这样做后，比只用乙醇洗一次的效果要好很多，我们所提RNA用nanodrop测得260/230
值均在2.0左右。
注意倒掉乙醇后再离心一次，把沾在管壁的乙醇离下来

⑶ 提取rna浓度在多少才算好的

rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求：浓度20ng/ul以上足够了，如果用的是组织提取，浓度一般很高，可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞，浓度低一些也没有关系。纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上，260/230值1.2以上基本合格。RT-PCR：最重要的是RNA是否有明显降解，这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮1.5-2.0倍，说明提取得不错。反转录·聚合酶链反应（reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR）是将RNA的反转录（reversetranscription）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。

⑷ 提的RNA260/230在1.0左右可以用吗

提的RNA260/230在1.0左右可以用。

260/230比值偏小，是有盐污染，260/230偏小说明溶液中含有有机溶剂，会对酶的效率有影响。

75％乙醇，4℃，7500g/min，离心5min；倒掉乙醇，再加入75％乙醇，条件同上，做第二次洗脱；再次掉转EP管在离心机中的方向（不再加入乙醇），7500g/min，4℃，离心3min后，用200μl的枪小心吸去乙醇，开盖晾干乙醇即可。

饱和与不饱和溶液的互相转化：

不饱和溶液通过增加溶质（对一切溶液适用）或降低温度（对于大多数溶解度随温度升高而升高的溶质适用，反之则须升高温度，如石灰水）、蒸发溶剂（溶剂是液体时）能转化为饱和溶液。

饱和溶液通过增加溶剂（对一切溶液适用）或升高温度（对于大多数溶解度随温度升高而升高的溶质适用，反之则降低温度，如石灰水）能转化为不饱和溶液。

⑸ a260/230比值低于1.8能用吗

不可以用的，数值低于1.8有污染，

输出结果的含义：

1. A260nm——核酸最高吸收峰的吸收波长。

2. A280nm——蛋白最高吸收峰的吸收波长。

3. A230nm——是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长。

4. A340nm——是基线校准波长，为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是，表明溶液中有悬浮物，需要纯化样品。纯样品的A340一般是0。

● A230产生负值主要是由于在很低 DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中，需要降低样品的稀释度，A230的负值会被校正。

● A260/A280比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯 RNA的A260/A280比值为2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。

● A260/A230比值可进行核酸样品纯度评估：纯

DNA和RNA的A260/A230比值为 1.8 –

2.2。若比值小于1.8表明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。当 260/230<1

时，通常只有两种情况。一是胍盐污染，二是蛋白污染。

dna提取时260/230比值较低。

1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸碱度及离子强度的影响，如酸溶液会使A260/A280比值降低，低离子强度和低 pH 溶液会增加 280 nm 处的光吸收值。因此必须确保空白检测和溶解样品所用Buffer的离子浓度和pH值一致。

2. 浓度接近2 ng/μl浓度的样品可能会导致不可靠的260/280和/或260/230的比值。

3. 样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素，由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在会干扰测试效果。样品的浓度不能过低，或者过高（超过光度计的测试范围）。

⑹ 纯的DNA OD260/280在 ，OD260/230应大于 。

260/280应该在1.9左右，反应DNA的质量。260/230也应在1.7左右，反应提取时的有机溶剂是否清洗干净。

⑺ 植物DNA提取实验，结果od260、od280、od230都很低，但是od260/280和od260/230值都在正常范围内，为什么

一、概念解析

首先我们需要明白的是，OD260和OD280，OD230代表了什么意思。

1、OD260代表了核酸的吸光度;

2、OD280代表了蛋白质的吸光度;

3、OD230代表了苯酚类等杂质的吸光度;

二、分析如下:

1、由此可见，决定DNA的因素主要是260这个值，而其他的两个值只是用来判断样本中是否有其他杂质，杂质是什么物质这个问题。

至于后面的OD260/OD280,OD260/OD230这两个比值，其实就是在满足以上OD260的情况下才去参考的值，用于区分DNA的纯度问题。

2、除去DNA的本质吸光度问题，其他的暂不具有可参考意义，所以及使即使比值是正常的，但不能说明实质性问题。

三、问题查找

1、以上结果首先比对抽提方法，以及使用试剂盒是否符合植物的DNA提取。

2、通过琼脂糖凝胶电泳或者4200或2100质控DNA的基本属性，观察此时值的变化。

3、也可以通过sanger测序简单验证，结果更准确。

⑻ 提取的DNA测OD值是260/230小于1.7是什么原因

比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A320一般是0。

A260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。

纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。

当 0.5％BSA蛋白质污染时，蛋白污染会导致260和280的数值都下降，其净结果是260/280比值下降，但260/280的比值变化并不显着，正如分子克隆3所说。

但蛋白残留会导致230的数值显着上升，显着影响260/230的比值。也就是说，如果RNA样品的260/280＝1.7，260 /230＝0.5，那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留，而是蛋白残留。

(8)260比230值多少合适扩展阅读

测DNA或RNA的OD值的含义：

范围内表示提取的DNA纯度较好,若小于1.7可能有蛋白污染，若大于2.0则说明有RNA污染或者DNA已经降解。260/230测的结果一般作为参考值，RNA提取时如果该值小于2说明裂解液中有异硫氰酸胍和巯基乙醇残留。

使DNA的纯度高，首先样品量合适，不能反复冻融，研磨时要充分，随时补充液氮，在样品未完全解冻前迅速加入裂解液中，后面的操作应尽量柔和，避免造成损伤。

RNA及DNA的提取,260/280测定用来鉴定DNA及RNA的纯度。260/280的值在1.8-2.0之间最好。

RNA 260/280<1.8说明有蛋白质、酚的污染，>2.0说明RNA降解。

DNA 260/280<1.8说明有蛋白质污染，>2.0说明RNA污染。

⑼ RNA抽提时 260/230的值不对是什么原因

260/230的值应该大于2，小于2主要是盐浓度高了，但一般没关系。