浓缩DNA一般多少温度

❶ DNA的溶解温度一般在什么范围内 不好意思，是熔解温度~

你确定是溶解不是熔解吧?
常用的是室温或者37℃,保存于4℃或者-20℃.
一般在TE溶液中,把DNA沉淀尽量吹散37℃放置1个小时.后如果发现还不能溶解的话,说明可能有阳离子盐类或者蛋白之类的跟DNA结合,如果是阳离子的加点Mg2+看看能不能起到一点作用,不过得防止你的DNA被降解了.

❷ 植物基因在组DNA提取为什么在65度水浴保温2

植物基因在组DNA提取为什么在65度水浴保温
不同生物（植物、动物、微生物）的基因组DNA的提取方法有所不同; 不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同，分离方法也有差
异。在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法, 以获得可用的DNA大分子。尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用,因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时, 应考虑除去多糖和酚类物质。
本实验以水稻幼苗为材料,学习基因组DNA提取的一般方法。
DNA
一、材料
水稻幼苗
二、设备
移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离 心管（有盖）及5ml和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。
三、试剂
1、提取缓冲液?：100mmol/L Tris?Cl, pH8.0, 20mmol/L EDTA, 500mmol/L
NaCl, 1.5% SDS。
2、提取缓冲液?：18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸钠，6.0gPVP，240ul巯基乙醇，加水至300ml。
3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇
4、 RnaseA母液：配方见第一章。
5、其它试剂：液氮、异丙醇、TE缓冲液，无水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。
四、操作步骤：
（一）水稻幼苗或其它禾木科植物基因组DNA提取
1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液?, 60?水浴预热。
2. 水稻幼苗或叶子5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热
的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60?水浴保温30-60分钟(时间长,DNA产量高), 不时摇动。
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤皮肤)，室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。
4. 室温下5000rpm离心5分钟。
5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。
6. 在1.5ml eppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。
7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60?水浴放置15分钟以上，以帮助溶解。
8. 将DNA溶液3000rpm离心5分钟, 上清液倒入干净的5ml离心管。
9. 加入5μl RNaseA(10μg/μl), 37? 10分钟, 除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响，可省略该步骤）。
10. 加入1/10体积的3mol/L NaAc及2×体积的冰乙醇,混匀,-20?放置20分钟左右,DNA形成絮状沉淀。

❸ dna复性温度要多少

温度55℃-60℃。有规定。dna长短与温度要求无关。
生物体的每个细胞（极个别例外，如人成熟的红细胞）每时每刻都进行转录形成mRNA.

❹ dna提取的DNA的浓缩

一.固体聚乙二醇（PEG）浓缩：用透析袋外敷PEG至合适量。
二.丁醇抽提浓缩：DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇，但DNA不会。因此重复几次可显着减少DNA体积。
三.乙醇或异丙醇沉淀：（1）需要阳离子盐的存在，NaAc最常用,NaCl对含SDS样品好，NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉淀RNA好，但不能用于反转录前。（2）沉淀温度与时间；0℃一4℃，12000g，10分钟，小于100bp DNA需超速离心。
四.精胺沉淀法：与DNA结合后使DNA结构凝缩沉淀，需在无盐或低盐溶液。

❺ DNA保存温度 DNA保存于4摄氏度可以放多久降解情况怎么样

为什么要保存在4℃呢?那好像是临时保存的温度.
现提取的样本的话还是－20℃好些,4℃太容易降解,最好当天用掉.
如果是扩增出来的就好多了,一般一周都没事,而在负20度可以保存一年.有报道说5℃暗中存于CsCl溶液中每年2000kb中只断裂一个磷酸二酯键,如果是真的这方法倒是很好…

❻ 为什么一般情况下选择94℃30s可使各种复杂的dna分子完全变性

为什么一般情况下选择94℃30s可使各种复杂的dna分子完全变性
基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点.在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90～95℃变性,再迅速冷却至40 ～60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70～75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸.对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性).
1. 变性温度与时间：变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因.DNA在其链分解温度时的变性只需几秒钟,但反应管内达到Tss还需一定时间,变性温度太高会影响酶活性;通常情况下93℃～94℃1min足以使模板DNA变性,若低于93℃则需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响.变性所需的加热温度取决于模板及PCR产物双链DNA中的G+C含量.双链DNA中的G+C的比率越高,则双链DNA分离变性的温度也就越高.变性所需的时间与DNA分子的长度相关,DNA分子越长,在特定的变性温度下使双链DNA分子完全分离所需的时间就越长.若变性温度太低或变性时间太短,则只能使DNA模板中富含AT的区域产生变性,当PCR循环中的反应温度降低时,部分变性的DNA模板又重新结合成双链DNA,从而导致PCR的失败.

❼ DNA的变性温度比蛋白质高,那么DNA变性失活的温度是多少

DNA变性的温度基本都会设置在90C以上，这样可以满足双链变性成单链。但是一旦温度降低，溶液中的两条互补的单链又会重新退火到一起，形成双链，任然具有生物学活性，并没有丧失活性。有人为了获得单链形式存在的DNA，会先进行5-10min的煮沸，然后急冷，让变成单链的DNA不再退火成双连。
不像蛋白，经过高温加热后，蛋白质变性，绝大部分就很难恢复了。
当然，如果将DNA在高温条件下长时间保存的话，会造成DNA的降解。所以不知道你是想让DNA变性，还是想让DNA失活？为什么？如果是为了要降解样品中的DNA的话，建议使用DNase。

❽ 请问dna在多少度高温下会破坏到无法检测

DNA在90～95度双链中的氢键会断裂，双链会解旋，即使回到原来的温度，没有dna聚合酶的帮助很难重新组合。但是DNA是双链反向对称的，也就是说只要检测一条链，整条DNA都能检测出来。也就是说利用高温使DNA失活可以，但不妨碍检测。
最后弱弱地问一句，题主想干啥坏事捏？

❾ 我想问我回收下来的DNA应该放到多少度保存在线等待

先问一下你下一步需要做什么？保存多长时间？

如果明天用，你可以放在-20冻上。既方便下一步实验，又可以有效保存。不建议长期保存这个东西，比如一个月。不过如果下一步连接，你的量比较大的化，保存一个月之后成功率也挺高的。

一般着一个小步骤，又不是什么重要的东西，你可以不必保存在-80或者液氮。你把上一步骤的质粒或者PCR模版留好就行了。