琼脂培养基多少温度不会凝固

1. 营养琼脂培养基放在40°的水域锅里为什么还会凝固

可能两个原因:1琼脂放的量过大,2:PH值偏高

2. 固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问题

1.加热器功率不能太高，也不能太低。
太高，容易沸腾和把培养基烧焦；太低，培养基容易凝固。

2.受热要均匀，可以垫上石棉网，要用玻璃棒不停缓慢搅拌。

3.加热完毕后，要在合适的温度（60℃左右）倒平板，防止凝固。

3. 琼脂为什么要冷却至45摄氏度

设定的原因主要是考虑到一般低于40℃，培养基开始凝固（当然，凝固温度和琼脂量以及琼脂的质量有很大关系，凝固温度其实不一定），倒入培养皿中会出现块状的固体，导致最后用于培养的培养基不均匀。不均匀的培养基表面不均匀，营养成分不均衡，甚至因为琼脂的不均衡导致凝固效果不好，影响后续操作、培养以及培养物的观察、对比。
而设定为45℃操作，一方面45℃到40℃有一个比较宽的操作空间，可以比较从容的进行操作，另一方面45℃的培养基拿在手中比较不烫手。

但是，刻意设定45℃倒培养基是很僵化的，因为实际操作中不会有人专门去拿温度计测量。
在实际操作中，用手触摸装有培养基的三角瓶，自己感觉手握不烫手即可拿起轻摇（注：不可摇出汽泡），此时培养基依然呈水样就可进行倒培养基了。只要倒培养基的基体还呈水样而且没烫到自己手，这个温度范围都可以。根据实验经验，基本也就是50℃－45℃左右。

至于加抗生素之类，一般55℃以下加都不会影响药性，而且普遍选择55℃－50℃加。因为实际操作中如果真等到45℃加，还没混匀，培养基就可能凝固了。
所以加激素、抗生素一般是手握三角瓶觉得可以忍受，但是仍感到些许烫手不能完全握住的时候加，也就是比倒培养基稍高一点点的温度加。

4. 高温灭菌与温度有关吗，为什么培养基凝固不住

有关。如果你的培养基配置没有问题，温度过低可能导致琼脂不能充分熔化，从而使倒板后不能凝固。

5. 琼脂溶解的温度是多少

琼脂的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大。它在水中需加热至95℃时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40℃时才开始凝固，所以它是配制固体培养基的最好凝固剂。用琼脂配制的固体培养基，可用以进行高温培养而不熔化，在凝固之前接种时，也不致将培养物烫死。因此，琼脂是制备各种生物培养基中应用最广泛的一种凝固剂。琼脂的浓度，通常是液体培养基的1～1.5%。

6. 到40℃时才开始凝固，那么50℃的琼脂是什么状态

设定的原因主要是考虑到一般低于40℃,培养基开始凝固（当然,凝固温度和琼脂量以及琼脂的质量有很大关系,凝固温度其实不一定）,倒入培养皿中会出现块状的固体,导致最后用于培养的培养基不均匀.不均匀的培养基表面不均匀,营养成分不均衡,甚至因为琼脂的不均衡导致凝固效果不好,影响后续操作、培养以及培养物的观察、对比. 而设定为45℃操作,一方面45℃到40℃有一个比较宽的操作空间,可以比较从容的进行操作,另一方面45℃的培养基拿在手中比较不烫手. 但是,刻意设定45℃倒培养基是很僵化的,因为实际操作中不会有人专门去拿温度计测量. 在实际操作中,用手触摸装有培养基的三角瓶,自己感觉手握不烫手即可拿起轻摇（注：不可摇出汽泡）,此时培养基依然呈水样就可进行倒培养基了.只要倒培养基的基体还呈水样而且没烫到自己手,这个温度范围都可以.根据实验经验,基本也就是50℃－45℃左右. 至于加抗生素之类,一般55℃以下加都不会影响药性,而且普遍选择55℃－50℃加.因为实际操作中如果真等到45℃加,还没混匀,培养基就可能凝固了. 所以加激素、抗生素一般是手握三角瓶觉得可以忍受,但是仍感到些许烫手不能完全握住的时候加,也就是比倒培养基稍高一点点的温度加.

7. 在配制固体培养基时为什么出现不凝固的现象

可能原因：
1、产品使用低凝固点琼脂粉，在室温温度情况下凝固的时间会比普通琼脂粉制备的培养基稍长；
2、灭菌温度过高或时间过长，引起pH改变造成培养基酸解；
3、琼脂未完全溶解就倾注平板或直接进行灭菌，造成培养基成分未充分混匀。

8. 营养琼脂培养基凝固时间

培养基凝固是因为其中的琼脂成分，待高温高压灭菌后，冷却到50摄氏度左右倾注平皿，30分钟左右就会凝固了。如果是琼脂含量相对少的半固体培养基，需要温度更冷一些才能明显凝固。

资料拓展

按照培养基标签，称取适量培养基干粉溶解于纯化水中，加热煮沸至琼脂完全溶解，分装试管或锥形瓶。将分装后的培养基置于规定的条件下进行灭菌处理，加热灭菌的培养基可反复煮沸4-6次至培养基完全溶解，倾入平皿中制成平板使用。

灭菌结束后，待培养基冷却至50摄氏度左右，可置于47至50摄氏度水浴保温（可根据实际培养基凝固温度适当提高水浴温度），放置时间一般不应超过4小时。临用前，加入相应的添加剂成分，摇匀后倾入平板，凝固后备用；或制成斜面、倾注使用等。

9. 3、 为什么营养琼脂培养基在使用前要保持地（46±1）℃的温度

营养琼脂培养基多数是用来进行菌落计数用的，温度过高细菌有可能会被烫死，温度过低则琼脂可能已经凝固。
当然实际工作中不会需要这么严格，一般手感不烫，温度就比较合适了。